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高RA甜叶菊辅助选择育种EST-SSR分子标记开发

发布时间:2019-09-08 22:17编辑:本站原创阅读(88)

    高RA甜叶菊辅助选择育种EST-SSR分子标记开发

    摘要:本实验以甜叶菊转录组数据为基础,基于EST-SSR分子标记为手段,通过分析甜叶菊EST-SSR与甜叶菊RA含量之间的关系,设计了85对EST-SSR引物,所得的PCR产物分别用琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺胶进行分离,通过PAGE对23个甜叶菊个体总体分析,其多态位点为31,多态性比率为%。 基于遗传相似系数的UPGMA聚类分析将甜叶菊的三个大类群明显聚为2支,将23个聚类为5大支。 在筛选出的31号引物中,在180bp的位置上,4种高RA的甜叶菊所得的扩增片段与其他甜叶菊相比缺失一条带,因此,31号引物有望成为筛选高RA甜叶菊材料的EST-SSR引物。 关键词:甜叶菊;EST-SSR分子标记;遗传多样性;RA;育种26229DevelopmentofEST-SSRMolecularMarkerforSelectionofHighRASteviaAbstract:BasedontheEST-SSRmolecularmarker,t31,%.Thepolymorphismof31atthethreemajorgroupsofSteviawereclusteredintotwogroups,,theamplifiedfragmentsoffourhighRAsteviale,primers31wereexp:Steviarebaudiana;EST-SSRmolecularmarkers;geneticpersity;RA;breeding目录摘要1关键词1Abstract1Keywords1源`自*六)维[论*文网引言11材料与方法实验材料、试剂及仪器21.1.1实验材料21.1.2实验试剂21.1.3实验仪器21.2实验方法21.2.1甜叶菊采集21.2.2DNA提取31.2.3PCR扩增31.2.3.1PCR扩增前实验准备31.2.3.2PCR扩增反应体系及反应条件31.2.3.3PCR产物的电泳分离42结果与分析42.1DNA提取结果42.2PCR反应结果52.2.1以全池为模板PCR结果52.2.2以半池为模板PCR结果62.2.3以单个材料为模板PCR结果102.3遗传多样性分析三类糖苷含量不同的甜叶菊类群间及个体间的遗传距离和聚类分析甜叶菊遗传多样性分析甜叶菊糖苷含量鉴别用引物153讨论16致谢16参考16图1甜叶菊基因组DNA4图2以全池为模板PCR结果5图3以半池为模板PCR结果(1)6图3以半池为模板PCR结果(2)6图3以半池为模板PCR结果(3)7图3以半池为模板PCR结果(4)7图4以半池为模板PAGE结果9图5以单个材料为模板PCR结果(1)10源`自*六)维[论*文网图5以单个材料为模板PCR结果(2)10图6甜叶菊基因组DNA重提结果11图7重提DNA的PCR结果11高RA甜叶菊辅助选择育种EST-SSR分子标记开发:。

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